Місце і час подій автор точно вказує в кінці переліку дійових осіб — Генуя, 1547 р. П’єсі передує епіграф римського історика Саллюстия про Каталине: «Це злодійство почитаю з ряду геть що виходять за незвичайності і небезпеки злочину». Молода дружина графа Фиеско ді Лаванья, ватажка республіканців в Генуї, — Леонора ревнує свого чоловіка до Джулії, сестрі правителя Генуї. Граф дійсно доглядає за цією кокетливою вдовуюча графинею, і вона просить у Фиеско в заставу любові подарувати їй медальйон з портретом Леонори, йому ж віддає свій.
Племінник Дории, правителя Генуї, Джанеттино підозрює, що в Генуї республіканці готують змову проти його дядька. Щоб уникнути перевороту, він наймає мавра вбити главу республіканців Фиеско. Але віроломний мавр видає план Джанеттино графу ді Лаванья і переходить до нього на службу.
В будинку республіканця Веррины велике горе, його єдина дочка Берта зґвалтована. Злочинець був у масці, але за описом дочки нещасний батько здогадується, що це справа рук племінника Дории. Прийшов до Веррине просити руки Берти Бургоньино стає свідком страшного прокляття батька — той замикає свою дочку в підземеллі власного будинку, поки кров Джанеттино не змиє ганьбу з його роду.
До Фиеско приходять дворяни Генуї, вони розповідають йому про скандал в синьйорії, що сталося при виборах прокуратора. Джанеттино зірвав вибори, він проткнув при голосуванні шпагою куля дворянина Цібо зі словами: «Куля недійсний! Він з дірою!» В суспільстві невдоволення правлінням Дории явно досягло межі. Це розуміє Фиеско. Він хоче скористатися настроєм генуезців і здійснити державний переворот. Граф просить мавра розіграти сцену замаху на нього. Як ді Лаванья і припускав, народ заарештовує «злочинця», той «зізнається», що підісланий племінником Дории. Народ обурений, що його симпатії на боці Фиеско.
До Джанеттино є його довірений Ломелліно. Він попереджає племінника Дории про небезпеку, що нависла над ним у зв’язку зі зрадою мавра. Але Джанеттино спокійний, він вже давно запасся листом за підписом імператора Карла і його печаткою. У ньому сказано, що дванадцять сенаторів Генуї повинні бути страчені, а молодий Дорія стане монархом.
В будинок Фиеско приходять генуезькі патриції-республіканці. Їх мета — схилити графа взяти на себе керівництво змовою проти герцога. Але ді Лаванья випередив їх пропозицію, він показує їм листи, в яких повідомляється про прибуття в Геную для «позбавлення від тиранії» солдат з Парми, «золота із Франції», «чотирьох галер папи римського». Дворяни не очікували такої спритності від Фиеско, вони домовляються про сигнал до виступу і розходяться.
По дорозі Веррина довіряє своєму майбутньому зятеві Бургоньино таємницю, що він уб’є Фиеско, як тільки тиран Дорія буде повалений, бо прозорливий старий республіканець підозрює, що мета графа — не встановлення республіки в Генуї. Ді Лаванья сам хоче зайняти місце герцога.
Мавр, посланий Фиеско в місто з метою дізнатися настрій генуезців, повертається з повідомленням про намір Джанеттино стратити дванадцять сенаторів, в тому числі і графа. Він приніс також порошок, який графиня Імперіал просила його підсипати в чашку з шоколадом Леоноре. Фиеско терміново скликає змовників і повідомляє їм про лист імператора у племінника Дории. Повстання повинно розпочатися цієї ж ночі.
Пізно ввечері в будинку Фиеско збираються генуезькі дворяни нібито на подання комедіантів. Граф виголошує полум’яну промову, в якій закликає їх повалити тиранів Генуї, і роздає зброю. Останнім у будинок вривається Кальканьо, який тільки що з палацу герцога. Там він бачив мавра, він зрадив їх. Все в сум’ятті. Прагнучи оволодіти ситуацією, Фиеско каже, що сам послав туди свого слугу. З’являються німецькі солдати охороняють герцога Дорию. Вони вводять мавра, з ним записка, в якій тиран Генуї повідомляє графу, що він сповіщений про змову і нині вночі навмисне пошле своїх охоронців. Благородство і честь не дозволяють Фиеско в такій ситуації напасти на Дорию. Республіканці ж непохитні, вони вимагають вести їх на штурм герцогського палацу.
На подання уявних комедіантів у будинок графа запрошена і Джулія. На очах у своєї дружини Леонори Фиеско розігрує сцену, домагаючись від графині Імперіал визнання в любові. Всупереч сподіванням, граф ді Лаванья відкидає
п
ламенную любов підступної кокетки, він кличе знаходяться в будинку дворян, повертає Джулії при свідках порошок, яким вона хотіла отруїти його дружину, і «шутовскую брязкальце» — медальйон з її портретом, саму ж графиню наказує заарештувати. Честь Леонори відновлена.
Залишившись наодинці зі своєю дружиною, Фиеско зізнається їй у коханні і обіцяє, що скоро вона стане герцогинею. Леонора боїться влади, їй миліше відокремлена життя в любові та злагоді, до цього ідеалу вона намагається схилити чоловіка. Граф ді Лаванья, однак, вже не в силах змінити хід подій, звучить гарматний постріл — сигнал до початку повстання.
Фиеско кидається до палацу герцога, змінивши голос, він радить Андреа Дории бігти, кінь чекає його біля палацу. Той спочатку не погоджується. Але, почувши шум на вулиці, Андреа під прикриттям охорони біжить з палацу. Тим часом Бургоньино вбиває племінника Дории і поспішає до будинку Веррины повідомити Берті, що вона помщуся і може покинути свою темницю. Берта погоджується стати дружиною свого захисника. Вони біжать у гавань і на кораблі покидають місто.
В Генуї панує хаос. Фиеско зустрічає на вулиці людину в пурпурному плащі, він думає, що це Джанеттино, і заколює племінника герцога. Відкинувши плащ вбитого, ді Лаванья дізнається, що зарізав свою дружину. Леонора не змогла всидіти вдома, вона кинулася в битву, щоб бути поруч зі своїм чоловіком. Фиеско убитий горем.
Герцог Андреа Дорія не в силах залишити Генуї. Він повертається в місто, воліючи смерть вічного скитанию.
Прийшовши в себе після смерті Леонори, Фиеско одягається в пурпуровий плащ, символ герцогської влади в Генуї. У такому вигляді його застає Веррина. Республіканець пропонує графу скинути одяг тирана, але той не погоджується, тоді Веррина захоплює ді Лаванья в гавань, де при сходженні по трапу на галеру скидає Фиеско в море. Заплутавшись у плащі, граф тоне. Поспішають на допомогу змовники повідомляють Веррине, що Андреа Дорія повернувся в палац та половина Генуї перейшла на його бік. Веррина теж повертається в місто, щоб підтримати правлячого герцога.